PCR анализ: какво е това? Как трябва да приемате PCR анализ

Не толкова отдавна разработи надежден, високо чувствителен и бърз метод за диагностициране на различни инфекциозни заболявания при хората. Такъв метод се нарича "PCR анализ". Какво е това, което е нейната същност, това, което той може да идентифицира микроорганизми и как да го вземе, ще опишем в тази статия.

История на откриването

Измислено на полимеразна верижна реакция (PCR) е американски учен Кери Myullis през 1983 г. Първоначално патентованата метод на диагностика с "Cetus Corporation", в която той е работил и неговия създател. Но през 1992 г. са били продадени всички права и патенти на фирма "Хофман-Ла Рош". След това се оказа, че подобни изследвания са извършени паралелно и са били докладвани от други американски биолози, като Елис Чен, Дейвид Едгар, Джон РВП. През 1980 г. той участва в този въпрос и съветските учени А. А. Slyusarenko Kaledin и С. Городецки. Ето защо, за да се определи собственика на едноличния авторското право не е било възможно. Много забележителни биохимици са допринесли за развитието на методи за реакция полимераза и CERN патентованата си нововъведения. В този момент анализ на PCR се провежда през специално оборудвани лаборатории.

РЕЗЮМЕ PCR диагностика

PCR анализ: какво е това и как работи той? Същността на метода се състои в това, че с помощта на специален ензим ДНК полимераза ин витро за увеличаване на обема на специфичен микробна среда. За да направите това многократно се размножават достъпно ДНК материал. По този начин, наличието на патоген в проба количеството ще се увеличи за сметка на биохимична лаборатория манипулиране и бактерии няма да е трудно да се открие в микроскоп.

Как е изучаването на материала?

За осъществяване на необходимия анализ:

• шаблон ДНК;
• праймери материал свързваща края на фрагмента;
• термостабилна ДНК полимераза ензим;
• химикали, гарантира правилното функциониране на ензими;
• се изисква буферен разтвор за създаване на подходящи условия за растежа и развитието на ДНК материал.

За извършване на PCR работи 25-30 повторения, състоящи се от три етапа: денатурация, хибридизация и удължение.

За да се анализира polimezarnoy верижна реакция с помощта на специално устройство - колоездач. Модерна техника ви позволява да инсталирате необходимите за отопление и охлаждане тръби програма за елиминиране на грешки по време на диагнозата.

Къде се кандидатства диагнозата?

метод верижна реакция Polimezarnoy се използват в различни области на медицината:

• Forensic употреба да идентифицира генетичния материал, като косми, слюнка или кръв;
• PCR анализ на кръв помага за генотипиране, например за откриване на индивидуален генетичен засадени отговор на специфична наркотици;
• по метод, определен семейни връзки между хората;
• най-търсените PCR метод се превърна в медицинската диагностика за определяне на различни инфекциозни заболявания.

Какво инфекции разкрива PCR?

По този начин, медицина отдавна се използва успешно PCR анализ. Какво е това, ние вече научили. А някои патогени могат да бъдат открити с него? PCR диагностициран следните инфекции :

• хепатит А, В, С;
• ureaplasmosis;
• кандидоза;
• хламидия;
• микоплазмоза;
• бактериална вагиноза;
• инфекциозна мононуклеоза;
• трихомониаза;
• HPV инфекция;
• туберкулоза;
• херпес инфекция на 1-ви и 2-ри тип;
• Helicobacter Pylori инфекция;
• цитомегаловирус;
• дифтерия;
• салмонелоза;
• ХИВ инфекция.

Също така, PCR методи се използват за диагностициране на рак.

Предимствата на метода

Диагностика PCR има няколко предимства:

1. Висока чувствителност. Дори само с няколко ДНК молекули микроорганизъм PCR анализ определя наличието на инфекция. Той помага метод за хронични и латентни заболявания, настъпили. Често в такива случаи, микроорганизмът е необработваема по други начини.
2. За да се изследва всеки подходящ материал, като слюнка, кръв, сексуална избор, коса, епителни клетки. Най-често е кръвен тест и урогениталния тампон PCR.

3. Не се изисква продължителен растящите култури. Автоматизираното процеса на диагностика позволява да се получат резултати от проучване, след 4-5 часа.
4. Методът е почти напълно автентични. Записано само изолирани случаи на фалшиви отрицателен резултат.
5. Възможност за идентифициране на няколко типа патогени в една проба материал. Това не само ускорява процеса на диагностициране на болестта, но и значително намалява разходите за материали. Често, лекарят предписва цялостен анализ на PCR. Проучване Цена, състояща се от определянето на шест патогени, е около 1500 рубли.

Препоръки за подготовка за анализ

Резултатите да бъдат валидни проучванията PCR трябва да бъдат изпитвани, следвайки препоръките на предварителните препарати за диагностика:

1. Преди доставката на слюнката да се въздържат от ядене и лекарство в продължение на 4 часа преди вземането на проби от материала. Непосредствено преди процедурата, изплакнете устата си с преварена вода.
2. Горните правила трябва да се ръководят и при вземане на проба от вътрешната страна на бузата. След измиване се препоръчва да се извършва лек масаж върху кожата да се освободи секретите на простатата.
3. Урина обикновено се събира у дома. За да направите това, трябва да се проведе задълбочено тоалетна на гениталиите. В стерилен пластмасов контейнер е необходимо да се събират 50-60 мл урина. Тя се препоръчва за жени, за да вмъкнете тампона във влагалището, и мъжете, доколкото е възможно, за да дръпнете кожната гънка да се гарантира чистотата на материала. Вие не може да вземе пробите по време на менструация.
4. За доставка на сперматозоидите да се въздържа от полово сношение по време на 3-те дни преди събирането на материал. Също така, лекарите се препоръчва да се откаже от използването на сауната и горещата вана, алкохол и пикантни храни. За 3 часа преди анализа е необходимо да се въздържат от уриниране.
5. За да се премине на урогениталния намазка, например, ако анализът на хламидия PCR, както жените, така и мъжете се препоръчва, че сексуалната почивка в продължение на 3 дни. 2 седмици преди анализа не могат да приемат антибиотици. За една седмица, трябва да спрете да използвате интимни гелове, мехлеми, вагинални свещички, промивка. 3 часа преди изследването трябва да се въздържат от уриниране. По време на менструация ограда материал, който не се извършва, само три дни след прекратяването на точки могат да се вземат урогениталния цитонамазка.

PCR по време на бременност

Периодът на изчакване за бебе, много инфекциозни болести, предавани по полов път болести, са изключително опасни за нормалното развитие на плода. Полово предавани болести могат да предизвикат вътрематочно развитие, спонтанен аборт или преждевременно раждане, вродени аномалии на детето. Ето защо е важно да се получи в началото на бременността скрининг PCR. Минете анализ е необходимо, когато се регистрират - до 12 седмици.

Ограда материал идва от цервикалния канал със специални четки. Процедурата е безболезнена и не представлява опасност за бебето. Обикновено по време на анализ за метод Chlamydia PCR, както и ureaplasmosis, микоплазмоза, цитомегаловирус, херпес, папиломавирус бременност. Такова изследване комплекс, наречен PCR 6.

PCR за диагностика на HIV

Поради факта, че методът на полимеразната верижна реакция е много чувствителен към промени в организма и условията за диагностика, много фактори могат да повлияят на резултатите. Следователно PCR анализ за HIV инфекция не е надежден метод, неговата ефективност - 96-98%. Останалите 24% на теста дава фалшиво положителни резултати.

Но в някои случаи без PCR диагностика на ХИВ не може да направи. Обикновено това се извършва на хора с фалшиво-отрицателни ELISA. Тези цифри показват, че лицето, което все още не е развила антитела към вируса и не може да бъде открит, без увеличаване на броя на множествена. Това може да бъде постигнато чрез провеждане на тест кръв PCR метод.

Също така е необходимо е диагнозата на децата през първата година от живота, роден на ХИВ-позитивни майки. Методът е единственият начин да се определи достоверно състоянието на детето.

PCR за диагностициране на хепатит

метод полимераза верижна реакция позволява откриване на ДНК на вируса на хепатит А, В, С, и преди образуването на антитела срещу появата на инфекция или симптом. Особено ефективен е PCR анализ на хепатит С, тъй като 85% от такива заболявания са асимптоматични и без своевременно лечение става хронична.

Навременното откриване на патогена ще помогне да се избегнат усложнения и продължително лечение.

Интегрираната PCR скрининг

Цялостен PCR анализ: какво е това? Този скрининг метод polimezarnoy верижна реакция, която включва определяне едновременно няколко вида инфекция: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma Hominis, Gardnerella Vaginalis, Candida, Trichomonas, цитомегаловирус, Ureaplasma urealitikum, херпес първият и вторият тип, гонорея папиломавирус. Цената на тази диагноза варира от 2000 до 3500 рубли. в зависимост от клиничната практика, материали и оборудване, както и от вида на анализа: количествени и качествени. Какво е необходимо, във вашия случай - лекарят реши. В някои случаи, може просто се открие наличието на патогена в други, като ХИВ, на важната роля на количествен титър. по-нататък "PCR анализ на 12" при диагностицирането на всички по-горе изследване патогени.

Дешифрирането резултатите от анализа

Транскрипция PCR анализ е ясна. Има само два индекса мащаб - ". Отрицателен" "положителна" и При откриване на патогена може лекари с 99% доверие тата потвърждават наличието на болестта и да се започне лечение на пациента. В количествен метод за определяне на инфекция в съответния индекс колона брой открити бактерии ще бъдат уточнени. Само лекар може да определи степента на заболяването и да предпише необходимото лечение.

В някои случаи, например при определяне на ХИВ инфекцията от PCR, с отрицателен резултат, съществува необходимост от допълнителни изследвания за потвърждаване на тези цифри.

Къде да се изследват?

Когато мине-PCR анализ в публичния клиниката или частна лаборатория? За съжаление, в медицински заведения оборудването и методите на общинската често остаряла. Затова е по-добре да се даде предимство на частни лаборатории със съвременно оборудване и висококвалифициран персонал. В допълнение, в частна клиника ще получите резултатите много по-бързо.

В Москва, много частни лаборатории предлагат PCR анализ на различни инфекции. Така например, в такива клиники като "Вита", "Интегрирана Clinic", "Щастливо семейство", "Uro-Pro", проведено PCR анализ. Проучване на цените е 200 рубли. за определяне на патоген.

Тя може да се заключи, че диагнозата на инфекциозни заболявания от PCR в повечето случаи е бърз и надежден начин за откриване на патогена в тялото в ранните етапи на инфекцията. И все пак, в някои случаи, за да изберете и други методи за диагностика. Определяне на необходимостта от подобно проучване може да бъде само специалист. PCR анализ Разшифроването също изисква професионален подход. Следвайте съветите на лекаря си и не дават свои собствени тестове, които не са необходими.